細胞實驗步驟：

一、細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺，紫外燈照射30min后再通風30min；

2.預熱培養基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

4.將凍存細胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

7.吸取9ml培養基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養基重懸細胞，將細胞懸液轉移到培養瓶內，補加適量培養基，輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻，并做好標記；

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態；

14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。

商品屬性：

產品介紹

BT-549細胞專用培養基由團隊精心優化，經過長期測試，本產品可保持BT-549細胞最佳的生長狀態。

本產品中已包含BT-549 細胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于BT-549 細胞的培養。

產品主要成分

RPMI-1640 基礎培養基                              445 ml

特級胎牛血清                                         50 mL

運輸和保存

運輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個月；?

注意事項：

僅限科研用。

培養體系中的一些組分是對人體健康有害的物質，請不要用暴露的皮膚接觸培養體系的液體和有培養體系的液體殘留的容器內部；這部分有害物質的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

細胞培養步驟：

?細胞復蘇?：

從液氮罐中取出凍存細胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細胞轉移到含有新鮮培養基的培養皿中，輕輕搖動使細胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞換液?：

吸除或倒掉培養皿內的舊培養液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細胞，以去除懸浮在細胞表面的碎片，重復幾次。

加入新的培養基。

?細胞傳代?：

當細胞長到80%~90%時，進行傳代。

吸除或倒掉瓶內舊培養液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動使消化液流遍所有細胞表面。

將培養瓶放入37℃培養箱中靜止幾分鐘，觀察細胞變化。當細胞間隙增大后，加入含有血清的培養液終止消化。

吹打細胞使其成為懸液，轉移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細胞培養液重懸細胞。

按比例分裝到新的培養皿中，補加新鮮培養基。

做好標記，放入37℃、5%CO2的培養箱中培養。

?細胞凍存?：

選擇對數生長期的細胞進行凍存。

將細胞轉移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細胞。

將細胞轉移到冷凍保存管中，標記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時后或過夜轉至液氮罐保存。

公司正在出售的產品：

小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA pcr檢測試劑盒

Human granzyme A (Gzms-A) ELISA Kit 人顆粒酶A(Gzms-A)試劑盒

Humaelaxin,RLNELISAKit 人松弛肽/松弛素(RLN)pcr檢測試劑盒分裝

CLIAKitfor6-OHDA(Human6-hydroxydopamine)ELISAKit人6-羥多巴胺

銀染法組織端粒酶活性AP電泳分析試劑盒10次

MouseMelatonin,MTELISAKit小鼠褪黑素(MT)試劑盒規格：96T/48T

大鼠多巴胺轉運蛋白(DAT)試劑盒 ，英文名： DAT ELISA Kit

Porcine noradrenaline (NE) ELISA Kit 豬去甲(NE)試劑盒

蝦特定基因序列(FC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforLXA4(HumanLipoxinA4)ELISAKit人脂氧素A4

體液總抗氧化能力(TAC)比色法(ABTS)定量試劑盒50次

ELISAKitVEGF雞血管內皮細胞生長因子

血管內皮生長因子A   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor A   英文縮寫：   VEGF-A

血管內皮生長因子C   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor C   英文縮寫：   VEGF-C

血管內皮生長因子D   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor D   英文縮寫：   VEGF-D

血管內皮生長因子165   英文名稱：   vascuiar endothelial growth factor 165   英文縮寫：   VEGF165

α-(1,3)-巖藻糖基轉移酶 4單克隆抗體

PerCP-Cy5.5標記人CD10單克隆抗體

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

Shiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型 0.5mgShiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌1*125ML/500ML

BT-549 細胞專用培養基Shiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型 0.5mgShiga-like toxin IIe variant subunit A 0139[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素Ⅱ型突變體(O139菌型)

CCL28 Protein Human 重組人 CCL28 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/Ohio/UR06-0091/2007) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

IL6R Protein Human 重組人 IL6R / CD126 蛋白

REG3A重組人 REG3A / HIP 蛋白 Protein