細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：

一、細(xì)胞復(fù)蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；

2.預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；

8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；

9.1000r/min,離心5min；

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；

11.吸棄上清液；

12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；

13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；

14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

商品屬性：

產(chǎn)品介紹

GIST-T1細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持GIST-T1細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含GIST-T1細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于GIST-T1細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

DMEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                                 445 mL

特級(jí)胎牛血清                                      50 mL

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意事項(xiàng)：

僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

?細(xì)胞復(fù)蘇?：

從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。

解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。

放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞換液?：

吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。

加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。

加入新的培養(yǎng)基。

?細(xì)胞傳代?：

當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。

加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。

將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。

吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。

棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。

按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。

做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?細(xì)胞凍存?：

選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。

加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。

將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豬生長(zhǎng)激素(GH)ELISA 試劑盒

Human kallikrein 10 (KLK 10) ELISA Kit 人10(KLK 10)試劑盒

GuineapigovalbuminspecificIgG,OVAsIgGELISAKit 豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVAsIgG)試劑盒分裝

CLIAKitforANG-1ELISAKit大鼠血管生成素1

血液氧化酶(DAO)活性熒光定量試劑盒20次

Porcineendothelin1,ET-1ELISAKit豬內(nèi)皮素1(ET-1)試劑盒

大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒 ，英文名： Tn-Ⅰ ELISA Kit

Rabbit P53 (P53) ELISA Kit 兔p53(p53)試劑盒

牛(BCV)核酸試劑盒(-PCR法) 48T

CLIAKitforMousesinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體

體液鈣離子濃度熒光定量試劑盒20次

ELISAKit6-OHDA人6-羥多巴胺

豬肉毒堿脂酰轉(zhuǎn)移酶（CACT）試劑盒   組裝/原裝

豬熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒   組裝/原裝

豬熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒   組裝/原裝

豬熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒   組裝/原裝

eIF4A1蛋白抗體

雙特異性磷酸酶2抗體

HA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Podoplanin Protein 平足蛋白抗原 0.5mgPodoplanin Protein 平足蛋白抗原

JAG1重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白  Protein

B3GALT5 Protein Human 重組人 B3GALT5 蛋白

SELE Protein Human 重組人 E-Select

GIST-T1 細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基Podoplanin Protein 平足蛋白抗原 0.5mgPodoplanin Protein 平足蛋白抗原

B3GALT5 Protein Human 重組人 B3GALT5 蛋白

HA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

SELE Protein Human 重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

JAG1重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白  Protein